產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
病毒基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的血漿、血清、病毒原液、鼻咽拭子和無細(xì)胞體液中提取高質(zhì)量的病毒 DNA。獨特的緩沖液/蛋白酶 K 體系能迅速裂解病毒，降解蛋白，DNA吸附于硅基質(zhì)膜上，通過快速的漂洗、離心步驟，去除雜質(zhì)，得到高純度的病毒DNA。本試劑盒具有高效、快速、方便之特點，所得病毒 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他雜質(zhì)，可直接用于 PCR、Real-Time qPCR、印跡等分子生物學(xué)實驗。
詳情介紹：
產(chǎn)品及特點
本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的血漿、血清、病毒原液、鼻咽拭子和無細(xì)胞體液中提取高質(zhì)量的病毒 DNA。獨特的緩沖液/蛋白酶 K 體系能迅速裂解病毒，降解蛋白，DNA吸附于硅基質(zhì)膜上，通過快速的漂洗、離心步驟，去除雜質(zhì)，得到高純度的病毒DNA。本試劑盒具有高效、快速、方便之特點，所得病毒 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他雜質(zhì)，可直接用于 PCR、Real-Time qPCR、印跡等分子生物學(xué)實驗。
它具有下列特點：
它具有下列特點：
1. 簡便快速：1 小時內(nèi)可獲得高純度的病毒 DNA；
2. 安-全：無需使用苯酚、氯仿等有機溶劑抽提，使用安-全；
3. 穩(wěn)定：所得病毒 DNA 純度高，重復(fù)性好，方便下游應(yīng)用。
成分規(guī)格
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Buffer GL |
15ml |
25ml |
50ml |
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Buffer W1（concentrate） |
13ml |
26ml |
52ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
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Proteinase K |
1ml |
2×1ml |
4×1ml |
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Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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蛋白酶 K 于-20℃ ，其他組分室溫（15 - 25℃），可保存12 個月 |
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本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
自備試劑
無水乙醇。
（注 意：使用前請先在緩沖液 Buffer RW1 和 Buffer RW2 中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽）
1. 取 1.5 ml 離心管（自備），加入 20 μl 的 Proteinase K 溶液。
2. 向離心管中加入 200 μl 血清、血漿、病毒拭子保存液或病毒原液、無細(xì)胞體液等，再加入 200 μl Buffer GL，渦旋震蕩充分混勻。
3. 56℃孵育 10 min，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 μl 無水乙醇，渦旋震蕩 15 sec，室溫放置 5 min，使溶液溫度降至室溫，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
(注 意：如果環(huán)境溫度超過 25℃，無水乙醇應(yīng)在冰上預(yù)冷后使用。)
5. 將一個吸附柱放入收集管中，將上一步所得溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12,000rpm離心 30 sec，棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer RW1，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
（注 意：在 Buffer RW1 濃縮液中按要求加入無水乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl 的 Buffer RW2，室溫 10,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl 的 Buffer RW2，室溫 10,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
（注 意： Buffer RW2 按要求加入無水乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發(fā)；如需進一步提高核酸純度，可重復(fù)步驟 7 一次。）
8. 室溫 12,000 rpm 離心 2 min，甩干殘留液體。
（注 意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響基因組 DNA 的后續(xù)使用）
9. 將離心吸附柱置于一個干凈的離心管中，小心打開吸附柱的蓋子，室溫放置2min，使吸附膜完全變干。
10. 加入 30 - 100 μl Buffer RE 或 DEPC-ddH2O，室溫放置 2 min。12,000 rpm離心1min，離心管底溶液即病毒 DNA。
（注 意：為增加洗脫效率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2 min，再次離心收集）
注意事項
1. 樣品避免反復(fù)凍融，否則會使蛋白變性或產(chǎn)生沉淀，導(dǎo)致提取的DNA片段小提取量下降。
4. 如 Buffer GB、Buffer RW1 結(jié)晶或產(chǎn)生沉淀，可在 56℃水浴溶解。
5. 所有離心步驟均為室溫下操作。
