異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌發(fā)過(guò)程中,通過(guò)乙醛酸循環(huán)及其他過(guò)程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL 是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。
測(cè)定原理:
ICL 催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和 NADH 在 LDH 的作用下生成乙醇和NAD,NADH 在 340nm 下有特征吸收峰,監(jiān)測(cè) 340nm 吸光度的減小速率可間接反應(yīng) ICL 活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制:
提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×3 瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑四:粉劑×3 瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑五:液體 800μL×2 支,4℃保存;臨用前每支加入 560μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑仍 4℃保存;
試劑六:粉劑×3 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水,充分混勻待用。用不完的試劑-20℃保存;