琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 25管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
SDH(EC 1.3.5.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。SDH是線粒體的一種標(biāo)志酶,位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶,是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外,為多種原核細(xì)胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。
測(cè)定原理:
SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下的氫通過(guò)吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過(guò)600nm吸光度的變化,測(cè)定2.6-DPIP的還原速度,代表SDH酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:50mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:10mL×1瓶,-20℃保存;
試劑三:1mL×1支,-20℃保存;
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存;
試劑五:粉劑×1支,4℃保存,臨用前加入2mL蒸餾水,用不完的試劑仍4℃保存;
試劑六:粉劑×1支,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,用不完的試劑4℃保存。