線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,中通常只含有NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH分布于細胞質(zhì)和線粒體中。
測定原理:
MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體50mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:液體10mL×1瓶,-20℃保存;
試劑三:液體1mL×1支,-20℃保存;
試劑四、液體50 mL×1瓶,在4℃保存;
試劑五、粉劑×2支,-20℃保存;臨用前加入300μL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑六、粉劑×2支,-20℃保存;臨用前加入300μL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。