Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機(jī)磷。
測(cè)定原理:
根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機(jī)磷,通過測(cè)定無機(jī)磷的量來確定ATP酶活性高低。
需自備的儀器及用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 5ml×1 瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×3 支,-20℃保存。用時(shí)每支加1mL蒸餾水;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑五:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑六:粉劑×1 瓶,4℃保存。用時(shí)加入3mL蒸餾水, 4℃保存。
試劑七:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時(shí)加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。
試劑八:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時(shí)加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。
試劑九: 液體 25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑十:10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液配制:將貯備液 20倍稀釋,即取 0.1mL試劑十加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:按H2O: 試劑七:試劑八:試劑九=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。