產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)氫酶-2測(cè)試盒(微量法)

  • 產(chǎn)品型號(hào)：100管/96樣
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：1380
  • 產(chǎn)品庫(kù)存：999
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
通蔚生物公司具有深厚行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人士組成，轉(zhuǎn)氫酶-2測(cè)試盒致力于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。
詳情介紹：

 轉(zhuǎn)氫酶-2測(cè)試盒
測(cè)定方法:    微量法
測(cè)定規(guī)格:    100管/96樣
保存條件:    低溫避光保存
有 效 期:     6個(gè)月
注   意 :      正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:
TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,把逆向反應(yīng)稱為T(mén)H-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測(cè)定原理:
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測(cè)定375nm光吸收的增加速率,來(lái)計(jì)算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:
組織、或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)胞,加入1mL試劑一,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測(cè)定從線粒體泄漏的TH-2(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體,加入500uL試劑二,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復(fù)30次),用于TH-2活性測(cè)定。




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