產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)氫酶-1測試盒(微量法)

  • 產(chǎn)品型號(hào)：100管/96樣
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：1840
  • 產(chǎn)品庫存：999
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
我司對(duì)于合格的工作人員必須給予平等的聘用、發(fā)展和升遷的機(jī)會(huì)，必須具備能力出眾的，他們的行為必須公正并符合道德，科研試劑產(chǎn)品全程自主研發(fā)，嚴(yán)控開發(fā)流程，保障轉(zhuǎn)氫酶-1測試盒質(zhì)量，緊抓售后服務(wù)。
詳情介紹：

轉(zhuǎn)氫酶-1 測試盒
測定方法:    微量法
測定規(guī)格:    100管/96樣
保存條件:     低溫避光保存
有 效 期:     6個(gè)月
注   意 :      正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:
TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為呼吸電子傳遞鏈復(fù)合體六,催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化。催化正向反應(yīng)稱為TH-1。線粒體NADH含量增加時(shí)會(huì)導(dǎo)致線粒體膜的H+電化學(xué)梯度升高,因而促進(jìn)了電子傳遞鏈上ROS的產(chǎn)生。TH-1促進(jìn)NADH轉(zhuǎn)換為NADPH,從而提高線粒體的抗氧化能力。

測定原理:
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代NADP+,TH-1催化 APADP+還原生成的APADPH在375nm有特征光吸收,因此通過測定375nm光吸收增加速率,來計(jì)算TH-1活性。

需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:
組織、或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬細(xì)胞,加入1mL試劑一,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11100g,4℃離心10min。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的TH-1(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體,加入500uL試劑二,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復(fù)30次),用于TH-1活性測定。



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