脯氨酸脫氫酶(ProDH)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
ProDH是存在于線粒體內(nèi)的催化脯氨酸降解的關(guān)鍵酶。脯氨酸是分布廣泛的一種滲透物質(zhì),在脅迫條件下很多植物可以通過(guò)增加合成、減少降解而在體內(nèi)累積大量脯氨酸,防止?jié)B透脅迫對(duì)植物造成傷害、保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有重要意義。
測(cè)定原理:
利用異硫氰酸甲酯檢測(cè)ProDH催化的脫氫反應(yīng),600nm處吸光值的吸光值的變化反映酶活性的高低。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,1500g 4℃離心15min,取上清液于一支新的EP管中,加入一滴試劑一(用10μL的槍頭加入),渦旋混勻,冰浴放置30min后,16000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。