產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
羥脯氨酸(HYP)測試盒上海通蔚生物專業(yè)提供各種種屬,各種系列ELISA試劑盒, 包含:人ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、其他各種ELISA試劑盒!
詳情介紹:
羥脯氨酸(HYP)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
2.細(xì)胞:取約500萬個(gè)細(xì)胞,加入1mL的細(xì)胞提取液,于高壓器中15磅保持30min,自然降壓后待測。
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和等,因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。測定原理:
樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一步被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對二甲氨基苯甲醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液560nm吸光值,可計(jì)算HYP含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、烘箱、玻璃管、離心機(jī)、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、無水乙醇、異丙醇、6mol/L鹽酸和蒸餾水。羥脯氨酸提取:
1.組織:稱取約0.2g樣品于玻璃管,加入2mL的組織提取液,置于110℃烘箱,水解6至12小時(shí),用提取液定容至2mL,12000g,25℃,離心20min,取上清待測。2.細(xì)胞:取約500萬個(gè)細(xì)胞,加入1mL的細(xì)胞提取液,于高壓器中15磅保持30min,自然降壓后待測。
3.血清游離羥脯氨酸提取:取0.1mL血清,加入0.5mL無水乙醇使蛋白質(zhì)沉淀,8000g4℃離心5min。將上清倒入另一個(gè)EP管,氮吹或沸水浴將乙醇揮發(fā)干。冷卻后再加入0.2mL50%異丙醇,充分溶解混勻待測。