產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒

  • 產(chǎn)品型號：100管/96樣
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：747
  • 產(chǎn)品庫存：999
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
我司線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒是滿足國內(nèi)科研及生產(chǎn)所需化學(xué)產(chǎn)品，企業(yè)經(jīng)營必須獲取可靠的利潤，我們必須嘗試新的構(gòu)想，必須堅(jiān)持研究工作，開發(fā)項(xiàng)目，對未來發(fā)展進(jìn)行投資，承擔(dān)錯(cuò)誤的代價(jià)并加以改正。
詳情介紹：

線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒
測定方法:    微量法
測定規(guī)格:    100管/96樣
保存條件:    低溫避光保存
有 效 期:     6個(gè)月
注   意 :正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

 測定意義:

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。

 測定原理:

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

 需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

 樣本測定的準(zhǔn)備:

組織、或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
1、稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
2、將勻漿液于600g,4℃離心5min。
3、棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
4、上清液即胞漿提取物,可用于測定從線粒體泄漏的MDH(此步可選做)。
5、在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),用于MDHm活性測定。



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