今天就為大家分享ELISA實驗的入門小技巧

對于ELISA實驗新手們來說，一場實驗下來還是有一定難度的，主要是因為還沒有掌握一些實驗中的小技巧，掌握了實驗技巧之后，做ELISA實驗會容易很多。今天就為大家分享ELISA實驗的入門小技巧，一起來看看吧！

1、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

2、合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

3、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

4、要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。

6、為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。

7、未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。

8、ELISA實驗中，加樣后及時放入孵箱，標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗徹底。

9、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉處理30分鐘后廢棄。

10、每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。

11、手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。

12、沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用純凈水配制溶液，切勿使用自來水。

13、在使用微量加樣器時，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭。

14、吸取液體時速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡。

以上就是上海通蔚今天就為大家分享ELISA實驗的入門小技巧，掌握了這些小技巧，做ELISA實驗就會容易很多。

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