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到貨處理
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1、收到細胞后，檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題，請即時聯(lián)系。
2、將細胞取出轉移至液氮或－80 度冰箱保存，建議盡早復蘇。
3、復蘇一管如有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系，會有技術人員與您溝通指導后再復蘇二管。
特別說明：未與我方聯(lián)系擅自復蘇二管出現(xiàn)問題不予售后。
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細胞復蘇
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1、從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸，接種 T25 培養(yǎng)瓶，于 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、隔天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
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細胞傳代
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1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細胞一次。
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀細胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳代（兩個 T25），補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶，放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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細胞凍存
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1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細胞一次。
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀細胞加入 1ml/支的無血清凍存液，混勻后加入凍存管中。（如：凍一支，加入 1ml 無血清凍存液）
4、將凍存細胞直接放入－80℃冰箱即可；如后期要將細胞轉入液氮罐中，需在-80℃冰箱存放 24 小時以上。
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T25細胞到貨處理
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觀察
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1、收到細胞后，請及時核對培養(yǎng)瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。
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處理
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1、75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40x,100x,200x 各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。
3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
4、收到細胞后，及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài)，并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞的傳代方法操作。
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貼壁
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1、未超過 80%匯合度時，及時更換新的專用培養(yǎng)基，放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng)；
2、超過 80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
3、首-次傳代，建議 1:2 傳代（兩個 T25）。
（注意：如收到密封培養(yǎng)瓶，處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)
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