產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：Razdan病毒RT-PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號：50次
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價格：3490
  • 產(chǎn)品庫存：100
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
Razdan病毒RT-PCR試劑盒根據(jù)Razdan病毒的保守基因序列設(shè)計的引物，具有良好的特異性。靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng)。使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。
詳情介紹：
產(chǎn)品及特點： 
1. 一站式，用戶不需要單獨準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對照。
2. 根據(jù)Razdan病毒的保守基因序列設(shè)計的引物，具有良好的特異性。
3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng)。
4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù)，RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。
規(guī)格及成分：

編號

成分

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL（橘黃蓋）

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL（紅蓋）

試劑三

超純水

1 mL（亮黃蓋）

試劑四

Razdan病毒RT-PCR 引物混合液

100 μL（白蓋）

試劑五

Razdan病毒 RT-PCR 陽性對照（1×10E8 /μL）

50 μL（黃蓋）

試劑六

使用手冊

1 份

注：為避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供專一的DNA 片段作為陽性對照。 
運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置，因為其容易污染其他成分，造成假陽性。
自備試劑：
樣品 RNA。
Razdan病毒RT-PCR試劑盒
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL Razdan病毒 PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液作為制備的陽性對照?？梢杂盟鳛橹苽涞年幮詫φ铡Ｖ苽渌贸蔀闃悠?RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容?？梢赃x購本公司的柱式病毒 RNAout。
二、設(shè)置RT- PCR 反應(yīng)(20μL 體系)：
3. 如果有 N+2 個樣品，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是RT-PCR 陽性對照，另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：

成份

N+2 個

樣品管

RT-PCR

陰性對照

RT-PCR

陽性對照

5×雙酶一管式RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

Razdan病毒 RT-PCR 引物混合液

各 2 μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各 12.5μL

--

--

超純水

--

12.5μL

--

Razdan病毒 RT-PCR 陽性對照的 1000倍稀釋液

--

--

12.5μL

MMLV-Taq Mix

1.5 μL

1.5 μL

1.5 μL

4.上機進行 RT-PCR，RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程

溫度

時間

逆轉(zhuǎn)錄

42℃

30 min

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR反應(yīng)35個循環(huán)

95℃

30 sec

58℃

30 sec

72℃

20 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測：
5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物，則說明實驗失敗，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、陽性對照必須有預(yù)期條帶出現(xiàn)，才有必要分析樣品的實驗結(jié)果，如果有預(yù)期片段大小的擴增產(chǎn)物則為陽性，如果無則為陰性。 
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