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編號
成分
規(guī)格
試劑一
PCR MagicMix 3.0
1 mL(紅蓋)
試劑二
超純水
1 mL(亮黃色)
試劑三
白茅根PCR鑒定引物混合液
100 μL(白蓋)
試劑四
白茅根PCR鑒定陽性對照(1×10E8 /μL)
50 μL(黃蓋)
試劑五
使用手冊
1 份
白茅根PCR鑒定試劑盒 使用方法 : 一、樣品 DNA 的制備: 1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。 2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加10μL白茅根PCR鑒定陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。 二、設置 PCR 反應(40μL 體系): 3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:
成份
N+2 個樣品管
PCR 陰性對照
PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0
各 20μL
20μL
各 2μL
2μL
N+2個樣品DNA模板
各18μL
--
PCR 陰性對照(水)
18μL
PCR 陽性對照(白茅根PCR鑒定陽性對照1000倍稀釋液)
過程
溫度
時間
預變性
95℃
5 min
PCR 反應(35 個循環(huán))
30 sec
55℃
72℃
40 sec
延伸
7 min