線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 25管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是線粒體內(nèi)膜中 的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ,同時(shí)可使O2還原生成O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
測定原理:
復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:25mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:5mL×1瓶,-20℃保存;
試劑三:0.5 mL×1瓶,-20℃保存;
試劑四:25mL×1瓶,-20℃保存;
試劑五:1 mL×1支,-20℃保存;
試劑六:粉劑×1支,-20℃保存,用時(shí)加入2mL蒸餾水;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
工作液的配制:臨用前將試劑五轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。