NADP磷酸酶(NADPase)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi) 催化NADP+降解為NAD+的酶,與NADK一起調(diào)控NAD和NADP之間的平衡。
測定原理:
NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無機(jī)磷的反應(yīng),通過測定無機(jī)磷的量來測定NADPase活性。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體30 mL×1瓶, 4℃保存。
試劑二:粉劑×5支,-20℃保存;用時每支加入1 mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃可保存一周。
試劑四:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃可保存一周。
試劑五:液體 25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑六:10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液配制:將試劑六20倍稀釋,即取 0.5mL試劑六加9.5蒸餾水,充分混勻。
定磷試劑的配制:按H2O: 試劑三:試劑四:試劑五=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷試劑
應(yīng)為淺黃色,若無色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注 意: 配試劑 用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
