谷氨酸脫羧酶(GAD)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注?意: 正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
谷氨酸脫羧酶是將谷氨酸轉(zhuǎn)化成抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(GABA)的限速酶,γ-氨基丁酸是中有效的抑制性神經(jīng)遞質(zhì),增進(jìn)腦活力、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞、保持神經(jīng)安定、目前在醫(yī)藥和保健食品中已有廣泛的應(yīng)用。
測(cè)定原理:
GAD 催化谷氨酸產(chǎn)生 GABA,利用 berthelot 反應(yīng)測(cè)定 GABA 含量,從而測(cè)定 GAD 活性。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、或細(xì)胞的處理:收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3S,間隔 10S,重復(fù) 30 次);8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),冰浴中勻漿。8000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。