半胱氨酸(Cys)含量測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中,Cys是 一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來,并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調(diào)節(jié)表皮下層的色素細胞生成的底層黑色素。具有美白。
測定原理:
Cys還原磷鎢酸生成鎢藍,在600nm處有吸收峰;通過600nm吸光度,計算Cys含量。
自備儀器和用品:
低溫離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、85%磷酸和蒸餾水。
半胱氨酸提取:
1、液體樣品中半胱氨酸提取:取0.1mL液體樣品,加試劑一0.9mL,充分混勻,8000g
4℃離心10min,取上清液,待測。
2、組織中半胱氨酸提取:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10 min,取上清液待測。
3、或培養(yǎng)細胞:先收集或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。