羧酸酯酶(CarE)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
哺乳動物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲氨酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內源性與外源性物質水解,但不能催化水解乙酰膽堿及其類似物。CarE參與脂質運輸和代謝,并且與多種環(huán)境毒物以及致癌物的和代謝有關,有機磷農藥可結合并且抑制CarE活性。
測定原理:
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計算CarE活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。
粗酶液提取:
細胞樣品制備
收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每200萬或細胞加入400μL試劑一,超聲波破碎或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);12000g 4℃離心30min,取上清液待測。
2、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿;12000g 4℃離心30min,取上清液待測。
3、液體:直接測定